Исследование фрагментации ДНК сперматозоидов

Спермограмма с оценкой морфологии по строгим критериям Крюгера является “золотым стандартом” оценки качества эякулята. К сожалению, несмотря на свою высокую информативность, спермограмма не может объяснить значительную часть случаев мужского бесплодия. Одной из достаточно распространенных причин снижения фертильности у мужчин является фрагментация ДНК сперматозоидов. Более того, сегодня уже известно, что эти нарушения напрямую связаны с задержками развития эмбриона, плохой имплантацией плодного яйца, выкидышами на ранних сроках беременности.

Что такое фрагментация ДНК

ДНК — нуклеиновая кислота, которая находится в ядре клетки — в головке сперматозоида. ДНК хранит в себе всю генетическую информацию об организме. В процессе оплодотворения эта информация передается ребенку.

В силу различных причин цепочка ДНК может повреждаться, в ней возникают разрывы. Это и называется фрагментацией. Чем больше таких разрывов в генетическом материале, тем меньше вероятность того, что сперматозоид сможет оплодотворить яйцеклетку. Даже если оплодотворение произошло, сохраняется риск неправильного развития и ранней гибели эмбриона.

Спермограмма не позволяет диагностировать повреждение ДНК, а такие методы оценки, как HBA-тест должны применяться с пониманием их косвенности. Гаметы с фрагментированной ДНК часто сохраняют хорошую подвижность и даже иногда способны к оплодотворению.

Почему происходит фрагментация ДНК

Нарушения могут произойти как на этапе созревания сперматозоида, так и в период его функциональной зрелости под воздействием большого количества внешних и внутренних факторов. К таковым относят:

• • неадекватное созревание сперматозоида;
• • нарушение естественной отбраковки спермиев с дефектным генетическим материалом;
• • варикоцеле;
• • воздействие ионизирующего излучения и токсических веществ;
• • злоупотребление алкоголем и курение;
• • возраст после 40 лет;
• • химиотерапия;
• • перенесенные ЗППП;
• • неблагоприятная экологическая обстановка в области проживания;
• • неправильное питание;
• • генетическая предрасположенность.

Показания к исследованию

• • идиопатическое мужское бесплодие;
• • безуспешные попытки ЭКО/ИКСИ;
• • бесплодие у мужчин старше 40 лет;
• • хронические заболевания урогенитального тракта;
• • перенесенные выкидыши, задержка развития эмбрионов; варикоцеле.

Исследование фрагментации ДНК сперматозоидов также проводится перед замораживанием донорского эякулята и при подготовке к процедурам ЭКО/ИКСИ.

Как проводится исследование

Сегодня существует немало методов оценки фрагментации ДНК. Мы используем с этой целью методику Tunel, которая доказала свою высокую информативность. Тест обладает высокой чувствительностью и специфичностью. Недостаток метода заключается в его трудоемкости и временных затратах. Проведение теста требует около 2 недель.

Суть метода состоит в микроскопическом исследовании эякулята и подсчете сперматозоидов с фрагментированным ДНК. Для этого образец спермы предварительно смешивают со специальным реактивом, который запускает реакцию, вызывающую заполнение разрывов ДНК флуоресцирующими нуклеотидами. Таким образом эмбриолог может наблюдать “подсвеченные” сперматозоиды с поврежденным генетическим материалом и четко отделить их от здоровых.

Расшифровка теста на фрагментацию ДНК сперматозоидов

Результат исследования предоставляется в процентах и отражает долю сперматозоидов с поврежденной ДНК. Каждый тест имеет свои референсные, то есть нормальные, значения. Для Tunel пороговое значение, при котором можно говорить о проблемах, связанных с фрагментацией генетического материала, составляет 15%.

Чем этот показатель выше, тем хуже прогноз наступления и вынашивания беременности, даже если показатели спермограммы в норме. Следует учитывать, что некоторое количество сперматозоидов с поврежденным ДНК может иметь место у вполне здоровых мужчин.

Как подготовиться к исследованию

Подготовка к исследованию фрагментации ДНК сперматозоидов проводится по правилам, которые применяются при подготовке к спермограмме.

Не стоит пытаться самостоятельно расшифровать результат анализа. Это может сделать только андролог, который имеет полную информацию о состоянии здоровья пациента. Это же относится и к определению показаний для проведения исследования.