Исследование фрагментации ДНК сперматозоидов
Спермограмма с оценкой морфологии по строгим критериям Крюгера является “золотым стандартом” оценки качества эякулята. К сожалению, несмотря на свою высокую информативность, спермограмма не может объяснить значительную часть случаев мужского бесплодия. Одной из достаточно распространенных причин снижения фертильности у мужчин является фрагментация ДНК сперматозоидов. Более того, сегодня уже известно, что эти нарушения напрямую связаны с задержками развития эмбриона, плохой имплантацией плодного яйца, выкидышами на ранних сроках беременности.
Что такое фрагментация ДНК
ДНК — нуклеиновая кислота, которая находится в ядре клетки — в головке сперматозоида. ДНК хранит в себе всю генетическую информацию об организме. В процессе оплодотворения эта информация передается ребенку.
В силу различных причин цепочка ДНК может повреждаться, в ней возникают разрывы. Это и называется фрагментацией. Чем больше таких разрывов в генетическом материале, тем меньше вероятность того, что сперматозоид сможет оплодотворить яйцеклетку. Даже если оплодотворение произошло, сохраняется риск неправильного развития и ранней гибели эмбриона.
Спермограмма не позволяет диагностировать повреждение ДНК, а такие методы оценки, как HBA-тест должны применяться с пониманием их косвенности. Гаметы с фрагментированной ДНК часто сохраняют хорошую подвижность и даже иногда способны к оплодотворению.
Почему происходит фрагментация ДНК
Нарушения могут произойти как на этапе созревания сперматозоида, так и в период его функциональной зрелости под воздействием большого количества внешних и внутренних факторов. К таковым относят:
- • неадекватное созревание сперматозоида;
- • нарушение естественной отбраковки спермиев с дефектным генетическим материалом;
- • варикоцеле;
- • воздействие ионизирующего излучения и токсических веществ;
- • злоупотребление алкоголем и курение;
- • возраст после 40 лет;
- • химиотерапия;
- • перенесенные ЗППП;
- • неблагоприятная экологическая обстановка в области проживания;
- • неправильное питание;
- • генетическая предрасположенность.
Показания к исследованию
- • идиопатическое мужское бесплодие;
- • безуспешные попытки ЭКО/ИКСИ;
- • бесплодие у мужчин старше 40 лет;
- • хронические заболевания урогенитального тракта;
- • перенесенные выкидыши, задержка развития эмбрионов; варикоцеле.
Исследование фрагментации ДНК сперматозоидов также проводится перед замораживанием донорского эякулята и при подготовке к процедурам ЭКО/ИКСИ.
Как проводится исследование
Сегодня существует немало методов оценки фрагментации ДНК. Мы используем с этой целью методику Tunel, которая доказала свою высокую информативность. Тест обладает высокой чувствительностью и специфичностью. Недостаток метода заключается в его трудоемкости и временных затратах. Проведение теста требует около 2 недель.
Суть метода состоит в микроскопическом исследовании эякулята и подсчете сперматозоидов с фрагментированным ДНК. Для этого образец спермы предварительно смешивают со специальным реактивом, который запускает реакцию, вызывающую заполнение разрывов ДНК флуоресцирующими нуклеотидами. Таким образом эмбриолог может наблюдать “подсвеченные” сперматозоиды с поврежденным генетическим материалом и четко отделить их от здоровых.
Расшифровка теста на фрагментацию ДНК сперматозоидов
Результат исследования предоставляется в процентах и отражает долю сперматозоидов с поврежденной ДНК. Каждый тест имеет свои референсные, то есть нормальные, значения. Для Tunel пороговое значение, при котором можно говорить о проблемах, связанных с фрагментацией генетического материала, составляет 15%.
Чем этот показатель выше, тем хуже прогноз наступления и вынашивания беременности, даже если показатели спермограммы в норме. Следует учитывать, что некоторое количество сперматозоидов с поврежденным ДНК может иметь место у вполне здоровых мужчин.
Как подготовиться к исследованию
Подготовка к исследованию фрагментации ДНК сперматозоидов проводится по правилам, которые применяются при подготовке к спермограмме.
Не стоит пытаться самостоятельно расшифровать результат анализа. Это может сделать только андролог, который имеет полную информацию о состоянии здоровья пациента. Это же относится и к определению показаний для проведения исследования.